實(shí)驗(yàn)操作中液相色譜儀器的常見細(xì)節(jié)問題如下：

流動(dòng)相相關(guān)：

流動(dòng)相選擇：選擇不合適的流動(dòng)相可能導(dǎo)致分離效果不佳、峰形異常等問題。例如，流動(dòng)相的極性、pH 值等與樣品的性質(zhì)不匹配，會(huì)影響樣品的出峰時(shí)間和峰形。另外，一些流動(dòng)相可能會(huì)與固定相發(fā)生相互作用，降低色譜柱的使用壽命。

流動(dòng)相過濾：如果流動(dòng)相沒有經(jīng)過充分過濾，其中的顆粒雜質(zhì)可能會(huì)堵塞色譜柱、管路或儀器的其他部件，影響儀器的正常運(yùn)行和分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，使用前必須用 0.45μm 或更細(xì)的膜對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過濾。

流動(dòng)相脫氣：流動(dòng)相中的氣泡會(huì)導(dǎo)致壓力波動(dòng)、基線不穩(wěn)、峰形異常等問題。所以，流動(dòng)相過濾后要用超聲波進(jìn)行脫氣處理，并且脫氣后應(yīng)恢復(fù)到室溫后再使用。

流動(dòng)相更換：更換流動(dòng)相時(shí)，如果兩種流動(dòng)相不互溶，需要用異丙醇等過渡溶劑進(jìn)行過渡，否則可能會(huì)產(chǎn)生沉淀或其他不良化學(xué)反應(yīng)，影響分析結(jié)果。

樣品處理相關(guān)：

樣品過濾：樣品中的雜質(zhì)可能會(huì)堵塞色譜柱或影響分析結(jié)果，所以進(jìn)樣前必須對(duì)樣品進(jìn)行過濾。過濾時(shí)要選擇合適的濾膜，其孔徑應(yīng)根據(jù)樣品中顆粒的大小來確定。

樣品溶劑選擇：樣品溶劑的選擇非常重要，應(yīng)盡量選擇與流動(dòng)相相溶的溶劑。如果樣品溶劑與流動(dòng)相不互溶，可能會(huì)導(dǎo)致峰形異常、分裂或出現(xiàn)前沿峰、拖尾峰等問題。

樣品濃度：樣品濃度過高可能會(huì)導(dǎo)致色譜柱過載，使峰形變寬、拖尾，甚至?xí)p壞色譜柱；樣品濃度過低則可能導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度不足。因此，需要根據(jù)儀器的檢測(cè)限和色譜柱的容量來確定合適的樣品濃度。

儀器操作相關(guān)：

泵的操作：

泵的壓力：泵的壓力異常是常見問題。壓力過高可能是由于色譜柱堵塞、管路堵塞、過濾器堵塞等原因引起的；壓力過低可能是由于泵密封墊圈磨損、有氣泡進(jìn)入泵體、管路泄漏等原因造成的。

泵的流速：流速不穩(wěn)定會(huì)影響分離效果和分析結(jié)果的重復(fù)性。在設(shè)置流速時(shí)，要根據(jù)色譜柱的規(guī)格和實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行合理選擇，并確保泵的流速準(zhǔn)確、穩(wěn)定。

進(jìn)樣操作：

進(jìn)樣量：進(jìn)樣量不準(zhǔn)確會(huì)影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。手動(dòng)進(jìn)樣時(shí)，要注意進(jìn)樣針的插入深度和位置，確保進(jìn)樣量準(zhǔn)確；自動(dòng)進(jìn)樣時(shí)，要定期檢查進(jìn)樣器的工作狀態(tài)，確保進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

進(jìn)樣閥切換：進(jìn)樣閥的切換速度和時(shí)間對(duì)分析結(jié)果有影響。切換速度過快或過慢，可能會(huì)導(dǎo)致樣品進(jìn)入色譜柱的時(shí)間不準(zhǔn)確，從而影響峰形和出峰時(shí)間。

柱溫控制：柱溫對(duì)分離效果和分析結(jié)果有重要影響。柱溫過高或過低，都會(huì)導(dǎo)致峰形異常、分離度下降等問題。因此，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的柱溫，并確保柱溫箱的溫度準(zhǔn)確、穩(wěn)定。

檢測(cè)器的設(shè)置：檢測(cè)器的參數(shù)設(shè)置對(duì)分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和靈敏度有影響。例如，檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇應(yīng)根據(jù)樣品的特性和實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行確定；檢測(cè)器的靈敏度應(yīng)根據(jù)樣品的濃度進(jìn)行調(diào)整，以避免信號(hào)飽和或檢測(cè)不到信號(hào)的情況發(fā)生。

儀器維護(hù)相關(guān)：

色譜柱的保養(yǎng)：色譜柱是液相色譜儀的核心部件，需要定期進(jìn)行保養(yǎng)。使用后應(yīng)及時(shí)清洗色譜柱，去除柱內(nèi)的殘留樣品和雜質(zhì)；長(zhǎng)期不用時(shí)，應(yīng)將色譜柱取下，用堵頭封好，并保存在合適的溶劑中。

儀器的清潔：定期對(duì)儀器的各個(gè)部件進(jìn)行清潔，去除灰塵、污垢和殘留的樣品等，以保持儀器的正常運(yùn)行。特別是進(jìn)樣針、管路、檢測(cè)器等部件，容易積累污垢和雜質(zhì)，需要定期進(jìn)行清洗。

儀器的校準(zhǔn)：定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，包括流速、壓力、波長(zhǎng)等參數(shù)的校準(zhǔn)，以確保儀器的準(zhǔn)確性和可靠性。